量子点在流式细胞分析术方面的应用
2015-03-20 1721

流式细胞分析术(Flow cyrometry, FCM)是一种先进的细胞定性定量分析技术,已广泛用于研究和临床实践中。


原理

一束单色光(通常是激光)照射流体力学聚焦的一股流体上。若干个检测器瞄向流束和激光相交的这个点,其中一个和激光在同一直线上(称作前散射,FSC),其它几个和激光垂直(旁散射,SSC和一个或几个荧光监测器),前散射与细胞体积相关,而旁散射取决于微粒的内部复杂程度(比如核的形状、胞质内颗粒的种类或者膜的粗糙程度)。当每个悬浮微粒通过光束时会按某种方式产生光散射,同时所带有的荧光化合物被激发并发射出波长大于激发光的荧光。这些散射光和荧光的组合数据被检测器记录,根据各检测器亮度的波动(每个细胞会显出一个散射或荧光的峰)就能够推算出每个颗粒的物理和化学性质,从而对细胞(或微粒)的理化、生物学性状和功能状态等进行定性或定量检测,方法简便快捷,灵敏度高。



应用

流式细胞术在很多领域中都有应用,包括分子生物学、病理学、免疫学、海洋生物学、医学等。特别是使用荧光标记的特异性抗体与靶细胞上的抗原结合,能够通过流式细胞仪研究这些细胞的特别信息,在生命科学和医学(尤其是器官移植、血液学、肿瘤免疫学和化疗、遗传学)领域中具有很广泛的应用。现代的流式细胞仪具有多个激光和荧光检测器,可以用于多色荧光抗体标记检测,以便在表现型中更准确地区别某个靶群体。

同时流式细胞仪也是很有用的分选仪器。当细胞或微粒通过时,可以被选择性地加上某种电荷,并在通过电磁场后偏转,从不同出口流出。这样就可以从一个混合物中高速(理论上可达到每秒大约9万个细胞)准确地分离开四类细胞。


量子点应用

量子点作为新型荧光纳米材料,具有荧光效率高、稳定性高、Stockes位移较大、发射光谱窄而对称、单一波长多色激发等诸多优秀的荧光特性,与流式细胞术相结合,可实现更高灵敏度的检测,并简化仪器光源和检测系统的设计与成本,是传统荧光材料的有益补充和完美替代,在流式细胞分析中具有广阔的应用前景。


图1,流式细胞仪(flow cytometer)


QD-FCM应用实例:


图2,使用QD-FCM研究CaV1/CaV2 钙离子通道(Kun Fang and Henry M Colecraft 2011)



图3,QD-FCM的热稳定性(Veena Kapoor and Fran T H